Efecto de la diferenciación celular en el contenido de fenoles y actividad antioxidante de extractos de cultivos in vitro de zapote blanco (Casimiroa edulis La Llave et Lex.)

Abstract

The white sapote (Casimiroa edulis La Llave et Lex.) (Rutaceae), is a native tree that is distributed in Mexico, whose fruits are a food source with antioxidant activity. Various parts of this plant are used in traditional Mexican medicine, for the treatment of hypertension, insomnia and anxiety. Due to these properties, and there is not program for their cultivation and propagation, it is necessary to establish in vitro cultures to evaluate the production of secondary metabolites, specifically phenolic compounds. The objective of this research was to establish in vitro cultures of white sapote from nodal segments of adult tree branches, collected in the four seasons of the year (spring, summer, autumn and winter), using five aseptic routines, as well as to determine the antioxidant activity and the content of total phenols and flavonoids in methanolic extracts of callus and plantlets in vitro, as well as from leaves and stems of an adult white sapote plant. In vitro establishment was achieved by culture nodal segments with apical and axillary buds, in MS medium (Murashige and Skoog), with 1 gL-1 of activated carbon, 5 gL-1 of Tecto60® and 500 mgL-1 of ampicillin, with 0.05 mgL-1 of benzyladenine (BA), kept in a culture room (25°C, 16 h of light with photoperiod, 32 μmolm²s-1). At 14 days, the best aseptic routine was R5 in explants collected in winter (84.7% survival, 5% contamination and 5% oxidation), which consisted of: Solution 1, commercial sodium hypochlorite (NaClO, 6% active chlorine) 10% v/v + 10 gL-1 Tecto60® for 5 min; Solution 2, neutral detergent (Hyclin®) 20% v/v + 10 gL-1 Tecto60® for 15 min; Solution 3, NaClO 20% v/v + 10 gL-1 Tecto60® for 20 min.El zapote blanco (Casimiroa edulis La Llave et Lex.) (Rutaceae), es un árbol nativo que se distribuye en México, cuyos frutos son una fuente de alimento con actividad antioxidante. Diversas partes de esta planta son utilizadas en la medicina tradicional mexicana, para el tratamiento de hipertensión, insomnio y ansiedad. Debido a estas propiedades, y a que no existe un programa para su cultivo y propagación, es necesario establecer cultivos in vitro para evaluar la producción de metabolitos secundarios, en específico de compuestos fenólicos. El objetivo de esta investigación fue establecer cultivos in vitro de zapote blanco a partir de segmentos nodales de ramas de árboles adultos, recolectadas en las cuatro estaciones del año (primavera, verano, otoño e invierno), utilizando cinco rutinas de asepsia, así como determinar la actividad antioxidante y el contenido de fenoles y flavonoides totales en extractos metanólicos de callos y plántulas in vitro, así como de hojas y tallos de una planta adulta de zapote blanco. El establecimiento in vitro se consiguió con la siembra de segmentos nodales con yemas apicales y axilares, en medio MS (Murashige y Skoog) con 1 gL-1 de carbón activado, 5 gL-1 de Tecto60® y 500 mgL-1 de ampicilina, con 0.05 mgL-1 de benciladenina (BA), mantenidos en cuarto de cultivo (25°C, 16 h de luz con fotoperíodo, 32 μmolm²s-1). A los 14 días, la mejor rutina de asepsia fue R5 en explantes recolectados en invierno (84.7% de supervivencia, 5% de contaminación y 5% por oxidación), que consistió en: Solución 1, hipoclorito de sodio comercial (NaClO, 6% de cloro activo) 10% v/v + 10 gL-1 Tecto60® por 5 min; Solución 2, detergente neutro (Hyclin®) 20% v/v + 10 gL-1 Tecto60® por 15 min; Solución 3, NaClO 20% v/v + 10 gL-1 Tecto60® por 20 min.